年度研究計劃及預期研究結果

示例：

本項目預計在4年内完成，具體(tǐ)進展計劃如下(xià)：

u  2016.01－2016.06：回顧性收集組織标本，定量PCR和免疫組化實驗檢測腸癌組織标本中(zhōng)A基因的表達水平，分(fēn)析臨床病理及預後的相關性；

u  2016.07－2016.12：過表達A基因和靶向A的RNAi慢(màn)病毒構建、包裝和純化，感染腸癌細胞，并通過實時定量PCR和western blot實驗方法檢測A的表達水平改變；

u  2017.01－2017.06：通過細胞實驗（MTT 生(shēng)長實驗，克隆形成實驗和轉移小(xiǎo)室實驗）驗證A被消減或過表達後，細胞表型的變化，在多株細胞株上做驗證；

u  2017.07－2017.12：通過pathway array，驗證A對于Y信号通路的影響及其下(xià)遊分(fēn)子信号通路的改變，鑒定調控的關鍵節點分(fēn)子。同時篩選A基因的相互作用蛋白(bái)；

u  2018.01－2018.06：根據篩選結果聚焦于對Y通路已有報道的靶分(fēn)子，利用co-IP實驗驗證A與靶分(fēn)子之間的相互作用關系，建立A調控Y通路的直接作用機制認識；

u  2018.07－2018.12：信息學預測作用靶位點，制備點突變載體(tǐ)對兩個分(fēn)子直接的結合位點進行驗證，明确結合的精細模式；

u  2019.01－2019.06：動物(wù)實驗驗證A對小(xiǎo)鼠移植瘤模型和轉移模型的影響，在組織樣本中(zhōng)檢測A基因調控的Y通路分(fēn)子和相互作用分(fēn)子的表達改變；

u  2019.07－2019.12：總結數據，發表論文，根據修回意見補充實驗。

預期研究結果

1）   揭示A參與腫瘤轉移細胞可塑性調控（科學問題）的功能，通過體(tǐ)内、體(tǐ)外(wài)實驗結合過表達和RNAi手段，證實其具有調節腫瘤細胞可塑性的表型并由此影響腸癌的轉移；

2）   闡明A通過介導Y調節Z作用的機制。不僅通過生(shēng)物(wù)信息學預測靶分(fēn)子，還要通過實驗進行驗證，找到A幹預的Y通路關鍵分(fēn)子，解析其相互作用模式。

3）   通過臨床樣本分(fēn)析，檢測A在腸癌組織及肝轉移竈中(zhōng)（臨床問題）的表達情況并分(fēn)析其與腸癌肝轉移及預後、生(shēng)存的相關性，明确A的臨床意義；

4）   在專業學術刊物(wù)上發表3-4篇SCI研究論文；

5）   培養博士生(shēng)1名，碩士研究生(shēng)2名；